Geri Yansıma Spektroskopisi ile Hücre Kültürü Çalışmalarında Hücre Sayısının Belirlenmesi İçin Yeni Bir Metot
[ X ]
Tarih
2020
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Amaç: Hücre kültürü, hastalıkların teşhisine ve tedavisineyönelik çalışmalarda ve ilaç araştırmalarında en sıkkullanılan yöntemdir. Hücre sayımı ise bu araştırmalardasıklıkla tekrarlanan deneylerin standardizasyonu ve /veya optimizasyonu için önemli bir süreç olarak kabuledilmektedir. Hücre sayımı otomatik hücre sayım cihazlarıile yapılabilmektedir. Ancak bu cihazlar yüksek maliyetve hücre kayıpları gibi dezavantajlara sahiptir. Hücresayısını belirlemenin en ideal yolu hücrelerin ortamlarınıdeğiştirmeden, önemli ölçüde pH veya sıcaklık değişimiyaratmadan hızlı ve doğru ölçüm yapabilmektir. Buçalışmanın amacı hücre kültürü deneylerinde hücre sayısınıbelirlemek için geri yansıma spektroskopisi kullanarak yenibir yöntem geliştirmektir.Materyal-Metot: Bu çalışmada, A375 malin melanomahücreleri standart hücre kültürü tekniği ile çoğaltıldı. Hücresayım cihazı ile sayılan farklı sayıdaki hücreler son hacim1 ml olacak şekilde ayarlandı. Daha sonra spektrometre,tungsten-halojen ışık kaynağı ve fiber optik probtan oluşanbir deney düzeneği kullanıldı. Numuneyle etkileştikten sonrageri yansıyan ışık fiber optik probun dedektör fiberleri iletoplandı geri yansıyan spektrumlar Igor Pro ile analiz edilerekhücre sayısı belirlendi.Bulgular: Farklı hücre sayılarındaki numunelerinspektrumların hücre sayısına bağlı olarak değiştiği belirlendi.Bu spektrumlardan elde edilen K (450-700 nm) parametresinekarşı hücre sayısını veren bir kalibrasyon grafiği bulundu. Buyöntem ile numunelerin hücre sayılarının %1,9-6,5 arasındakihata oranları ile belirlendi.Sonuç: Bu çalışmada fiber optik prob ile dalga boyuna bağlıgeri yansıma ölçümleri yapılarak hücre kültürü koşullarınaminimum müdahale ederek hücre sayısını gerçek zamanlıbelirleyebilen yeni bir yöntem geliştirildi. Bu yöntem hücresayısının zamana bağlı izlenmesine olanak veren invazifolmayan, objektif, tekrarlanabilir ve tecrübe gerektirmeyenbir teknik olarak geliştirilme potansiyeli vardır.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
Mikroskopi,Biyoloji,Bilgisayar Bilimleri, Yazılım Mühendisliği,Onkoloji
Kaynak
Süleyman Demirel Üniversitesi Sağlık Bilimleri Dergisi
WoS Q Değeri
Scopus Q Değeri
Cilt
11
Sayı
2
