Lipopolisakkaritle İndüklenmiş Monoküleer Hücrelerde Timokinonun Proinflamatuar Sitokin Salınımına Etkisi
Abstract
Lipopolisaakrit (LPS)’ler, infeksiyonlar ve farklı yollarla dolaşım sistemine
karışarak septik şok tablosuna yol açıp ölüme neden olabilir. Bu çalışmada Nigella sativa
(çörek otu) tohumlarının ana bileşeni timokinonun LPS-ile indüklenen kan mononükleer
hücreleri (MNH)’nde proinflamatuvar sitokin ekspresyonu üzerindeki etkilerinin
araştırılması amaçlanmıştır.
Konsantrasyon-gradient santrifüj yöntemi ile 10 sağlıklı donörün kan
örneklerinden MNH izole edildi. Hücreler, 4 saat boyunca LPS'ye maruz bırakıldı. 100
ng/ml LPS, 10-100 µM timokinon, 1 µM deksametazon ve bunların kombinasyonlarını
içeren gruplar oluşturularak IL-1β, TNF-α, IFγ ve IL10 mRNA ekspresyonları RT-qPCR
ve ELISA yöntemi kullanlarak analiz edildi.
Timokinon tüm hücre gruplarında TNFα, IFγ ve IL-1β mRNA
ekspresyonlarında ciddi azalmalara neden oldu. Antiinflamatuvar sitokin olan IL-10’un
mRNA ekspresyonlarında ise LPS ile indüklenen gruplarda artış görüldü. Bunun aksine
kısa süreli maruziyet sonrasında protein ekspresyonlarında değişiklikler anlamlı değildi.
Bu çalışma, timokinonun proinflamatuvar sitokinlerin mRNA ekspresyonunu
baskılayabileceğini ve IL-10 üzerinden antiinflamatuvar etkileri olabileceğini işaret
etmektedir. Bununla beraber sitokin ekspresyonuna etkilerin uzun süreli maruziyet ya da
in vivo modellerde teyit edilmesi gerekmektedir. Çalışmamız sepsis ve olasılıkla
proinflamatuvar sitokinlerin etkin olduğu diğer inflamasyon durumlarında timokinon
antiinflamatuvar ajan olma potansiyeli göstermektedir. Lipopolysaccharides (LPS) can enter the systemic circulation through various
infections, causing septic shock and death. In this study, it was aimed to investigate the
effects of thymoquinone, the main component of Nigella sativa (Nigella sativa) seeds,on
proinflammatory cytokine expression in LPS-induced blood mononuclear cells (MNC).
MNCs were isolated from blood samples of 10 healthy donors by concentration gradient centrifugation method. Cells were exposed to LPS for four hours. Groups
containing 100 ng/ml LPS, 10-100 µM thymoquinone, 1 µM dexamethasone and their
combinations were formed and IL-1β, TNF-α, IFγ and IL10mRNA expressions were
analyzed using RT-qPCR and ELISA method.
Thymoquinone caused remarkable reduction in TNFα, IFγ and IL-1β mRNA
expressions in all cell groups. The mRNA expressions of IL-10, an anti-inflammatory
cytokine, were increased in LPS-induced groups. In contrast, changes in protein
expressions were not significant after short-term exposure.
This study indicates that thymoquinone can suppress mRNA expression of
proinflammatory cytokines and may have anti-inflammatory effects on IL-10. However,
effects on cytokine expression need to be confirmed in long-term exposure and in vivo
models. Our study shows the potential for thymoquinone to be an anti-inflammatory agent
in sepsis and possibly other inflammation conditions where proinflammatory cytokines
are active.
Collections
- Tez Koleksiyonu [242]